细胞分离纯化技术
撰稿 金伯泉
从外周血、骨髓、外周淋巴器官或各种组织分离出来的细胞是多种细胞的混合物,如要研究某种特定细胞的结构、功能或表面标志等特征,首先要分离纯化细胞。细胞纯化可根据其大小、密度、表面荷电、吸附能力或表面抗原的差异而采用密度梯度沉降法、细胞电泳、贴附、亲和层析、花环形成、补体介导杀伤溶解以及流式细胞仪(FCM)等方法来进行纯化。用于密度梯度沉降法分离细胞的介质应符合下列要求:(1)能产生一定程度的密度梯度,高密度时粘度不高;(2)PH中性或PH易于调整;(3)浓度不同时渗透压变化不大;(4)对细胞无毒性,细胞洗涤后能用于体外培养,分离液要无菌或能通过除菌滤膜。
Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞